蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所是蛋白質(zhì)合成的模板，模板與氨基酸的連接處，核糖體mRNA tRNA，蛋白質(zhì)合成的原料是20種aa。起初，根據(jù)每三個(gè)核苷酸代表一個(gè)氨基酸的原理，依次合成一條多肽鏈的過(guò)程。蛋白質(zhì)生物合成的步驟？(1)翻譯后的起始核糖體與mRNA結(jié)合，與氨酰-tRNA形成起始復(fù)合物。?(2)肽鏈核糖體沿mRNA 5'端移動(dòng)到3'端，從N端到C端的肽合成開(kāi)始。這是蛋白質(zhì)合成過(guò)程中*快的階段。?(3)肽鏈終止和核糖體的釋放與mRNA解離，準(zhǔn)備新一輪的合成反應(yīng)。內(nèi)容 ● Genetic code-triplets 1.1 遺傳密碼-triplets 三元組密碼定義了mRNA鏈上每三個(gè)核苷酸翻譯成蛋白質(zhì)多肽鏈上的一個(gè)氨基酸，或肽鏈的起始和終止信號(hào)合成時(shí)，這三個(gè)核苷酸稱(chēng)為密碼子或三聯(lián)體密碼子。mRNA 5 ′ CUA UGA ACU AGU …CGG 3 ′方向（一） 破譯三元組密碼？首先從數(shù)學(xué)的角度考慮：mRNA中有4種核苷酸，蛋白質(zhì)中有20種aa。或肽鏈合成的起始和終止信號(hào)，這三個(gè)核苷酸稱(chēng)為密碼子或三聯(lián)體密碼子。mRNA 5 ′ CUA UGA ACU AGU …CGG 3 ′方向（一） 破譯三元組密碼？首先從數(shù)學(xué)的角度考慮：mRNA中有4種核苷酸，蛋白質(zhì)中有20種aa?；螂逆満铣傻钠鹗己徒K止信號(hào)，這三個(gè)核苷酸稱(chēng)為密碼子或三聯(lián)體密碼子。mRNA 5 ′ CUA UGA ACU AGU …CGG 3 ′方向（一） 破譯三元組密碼？首先從數(shù)學(xué)的角度考慮：mRNA中有4種核苷酸，蛋白質(zhì)中有20種aa。

? 如果一種核苷酸代表一種氨基酸，則蛋白質(zhì)中只能有4種氨基酸。用兩個(gè)核苷酸作為一個(gè)aa的代碼，只能代表42=16種aa，少于20種是不行的。如果3個(gè)核苷酸代表一個(gè)aa，則可以有43=64個(gè)編碼，可以滿(mǎn)足編碼20個(gè)aa的要求。三聯(lián)體密碼解讀 核苷酸序列 氨基酸序列 mRNA 5' AUCGACCUGAGC 3' 4 20 (×) mRNA 5' AUCGACCUGAGC 3' 42=16 20 (×) mRNA 5' AUCGACCUGAGC 3' 43=64 20 (√) ?Crick其他人首先從遺傳學(xué)的角度證實(shí)了這個(gè)概念是正確的。在模板 mRNA 中插入或刪除 bp 將改變密碼子的所有后續(xù) aa 序列。如果模板同時(shí)插入和刪除，插入和刪除的堿基數(shù)相同，后續(xù)的密碼子序列不會(huì)發(fā)生變化，翻譯得到的蛋白質(zhì)序列保持不變（突變密碼子所代表的aa除外）。如果同時(shí)刪除 3 個(gè)核苷酸，翻譯將產(chǎn)生一個(gè)缺失一個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，序列不會(huì)改變。1950 年代和 1960 年代在破譯遺傳密碼方面的三項(xiàng)重要成就1）Paul Zamecnik 等人證實(shí)了細(xì)胞中蛋白質(zhì)合成的位置。

? 他們將放射性標(biāo)記的aa注射到大鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后取肝，沉淀蔗糖梯度，分析各種細(xì)胞成分中的放射性蛋白。? 如果在注射后幾小時(shí)（或幾天）取出肝臟，所有細(xì)胞成分都含有放射性標(biāo)記的蛋白質(zhì)；？如果在注射后幾分鐘內(nèi)取出肝臟，那么放射性標(biāo)記的蛋白質(zhì)僅存在于核糖體顆粒的細(xì)胞質(zhì)成分中。2）弗朗西斯·克里克等人。首次證明，只有以三聯(lián)體密碼的形式，才能將AUGC四個(gè)字母所包含的遺傳信息（核酸）準(zhǔn)確翻譯成由20個(gè)不同aa組成的蛋白質(zhì)序列。實(shí)現(xiàn)遺傳信息的表達(dá)。? 實(shí)驗(yàn)一：用吖啶試劑（誘導(dǎo)核苷酸插入或丟失）處理 T4 噬菌體 rII 位點(diǎn)的兩個(gè)基因，引起移碼突變（frame-shift），產(chǎn)生完全不同的、無(wú)功能的蛋白質(zhì)。? 實(shí)驗(yàn)二：煙草壞死衛(wèi)星病毒研究發(fā)現(xiàn)其外殼蛋白亞基由400個(gè)氨基酸組成，對(duì)應(yīng)的RNA片段長(zhǎng)度為1200個(gè)核苷酸，與密碼三聯(lián)體系統(tǒng)完全匹配。? 實(shí)驗(yàn)三：以均聚物為模板，指導(dǎo)多肽合成。在含有tRNA、核糖體、AA-tRNA合成酶等蛋白質(zhì)因子的細(xì)胞提取物中，當(dāng)加入mRNA或人工合成的均聚物作為模板和ATP、GTP、aa等成分時(shí)，可合成新的肽鏈，

1961 年，當(dāng) Nirenberg 等人 以poly(U)為模板，他們發(fā)現(xiàn)合成了poly-Phe，并引入了UUU來(lái)代表Phe。Poly(C)和poly(A)分別作為模板得到poly-Pro和poly-Lys。? 實(shí)驗(yàn)4：以特定序列的共聚物為模板，指導(dǎo)多肽的合成。多聚二核苷酸可以作為模板合成由2個(gè)氨基酸組成的多肽蛋白質(zhì)時(shí)間翻譯的模板，5'...UGU GUG UGU GUG UGU GUG...3'，無(wú)論讀數(shù)是從U還是G開(kāi)始，只能有UGU（Cys )和GUG(Val)兩個(gè)密碼子。? 實(shí)驗(yàn)5：以共三核苷酸為模板，可以得到三種aa肽。如果使用UUC作為模板，可能有3種方式開(kāi)始閱讀：5′…UUC UUC UUC UUC UUC…3′或5′…UCU UCU UCU UCU UCU…3′或5′…CUU CUU CUU CUU CUU ... 3′ 產(chǎn)生 UUC (Phe)，分別是UCU（Ser）還是CUU（Leu）。？當(dāng)使用多聚三核苷酸作為模板時(shí)，只能合成兩種多肽： 5'...GUA GUA GUA GUA GUA...3' 或 5'...UAG UAG UAG UAG UAG...3' 或 5'...AGU AGU AGU AGU AGU...3'第二種讀法生成的密碼子UAG是終止碼，不編碼任何aa，因此只有GUA（Val）或AGU（Ser）。

? 實(shí)驗(yàn) 6：使用隨機(jī)聚合物指導(dǎo)肽合成。尼倫伯格等人。奧喬亞等人。使用各種隨機(jī)聚合物作為模板合成肽。例如，以?xún)H含A和C的多核苷酸為模板，可任意排列出現(xiàn)8種三聯(lián)體，即CCC、CCA、CAC、ACC、CAA、ACA、AAC、AAA，從Asn、His、A多肽中獲得由 6 個(gè)氨基酸組成，包括 Pro、Gln、Thr 和 Lys。3） 氨基酸“活化”與核糖體結(jié)合技術(shù)？以UUU、UCU等人工合成的3bp為模板。在含有核糖體和AA-tRNA的反應(yīng)液中孵育后蛋白質(zhì)時(shí)間翻譯的模板，它通過(guò)纖維素膜，游離的AA-tRNA由于其低分子量而通過(guò)過(guò)濾膜，而核糖體或與核糖體結(jié)合的 AA-tRNA 保留在濾膜上，因此可以分離結(jié)合和未結(jié)合的 AA-tRNA。? 如果用20種酶做20組同一個(gè)實(shí)驗(yàn)，每組含有20種酶和各種3bp，但只有一種